مساء الخير 🧡 ، تكلمت قبل عن أغلب مواضيع المناعة بتكلم خِلال هاليومين عن لاب المناعة والتكنيك اللي نستخدمها وبعدها نخلص المناعه 😍
Immunoassay: هي عِباره عن تستات نسويها بتشوف لي اذا المادة موجودة او لا وكميتها، وفي لاب المناعة احنا دائماً نبحث عن Ab أو Ag.
فيه عِندنا عِدة تكنيكات نستخدمها عشان نكشف عن Ab- Ag reaction واليوم ان شاء الله بتكلم عن أول اثنين منهم
خلونا نِبتدي بأول وحدة واللي هي precipitation:
شنو الهدف من هالتست؟ انا هنا أبي اعرف كمية Ab أو Ag الموجودة عندي
⁃في precipitation الاثنين Ab, Ag بيكونون soluble وبعد مايتفاعلون بيصيرون insoluble
شنو الهدف من هالتست؟ انا هنا أبي اعرف كمية Ab أو Ag الموجودة عندي
⁃في precipitation الاثنين Ab, Ag بيكونون soluble وبعد مايتفاعلون بيصيرون insoluble
طبعاً التفاعل بين Ab + Ag مارح يصير الا اذا كانوا بكميات متساوية
اذا كان Ab موجود بكمية أكبر مارح يصير تفاعل وهالنقطة بنسميها " prozone phenomenon”
ولما يكون Ag هو اللي كميته أكبر بعد مارح يكون فيه تفاعل وهالنقطة بنسميها " postzone phenomenon “
اذا كان Ab موجود بكمية أكبر مارح يصير تفاعل وهالنقطة بنسميها " prozone phenomenon”
ولما يكون Ag هو اللي كميته أكبر بعد مارح يكون فيه تفاعل وهالنقطة بنسميها " postzone phenomenon “
التفاعل فقط بيتكون لما يكونون الاثنيين متساويين “ equivalence zone “
فَ أنا لما مثلاً ابي اعرف كمية Ag محدد شنو أسوي؟ راح أحط Ab بكمية أنا عارفتها وبظل أضيف Ag وفي النقطة اللي بيصير فيها تفاعل انا هنا اعرف انهم متساويين وبِما اني اعرف كمية Ab مُسبقاً ف أنا عرفت كمية Ag
فَ أنا لما مثلاً ابي اعرف كمية Ag محدد شنو أسوي؟ راح أحط Ab بكمية أنا عارفتها وبظل أضيف Ag وفي النقطة اللي بيصير فيها تفاعل انا هنا اعرف انهم متساويين وبِما اني اعرف كمية Ab مُسبقاً ف أنا عرفت كمية Ag
فيه أنواع لِ precipitation وأنا بتكلم عن اثنين مِنهم اللي هم:
⁃Radial immunodiffusion “ Mancini “
⁃Ouchterlony gel diffusion “ double immune diffusion “
⁃Radial immunodiffusion “ Mancini “
⁃Ouchterlony gel diffusion “ double immune diffusion “
نتكلم أول عن radial immunodiffusion:
هِنا mainly أبي أشوف كمية Ag
الطريقة: - Ab in gel, Ag in well
هِنا mainly أبي أشوف كمية Ag
الطريقة: - Ab in gel, Ag in well
راح أحطهم وأستنى التفاعل بينهم يصير، وكل ماكبرت الدائرة معناها كمية Ag عندي أكثر
•مثلاً الدائرة رقم ٣ مب عارفة كميتها بروح بضيف Ab للأربع دوائر وبشوف ان الدائرة ٣ كميتها بين دائرة ٢ وبين دائرة ٤
•مثلاً الدائرة رقم ٣ مب عارفة كميتها بروح بضيف Ab للأربع دوائر وبشوف ان الدائرة ٣ كميتها بين دائرة ٢ وبين دائرة ٤
هِنا فهالصورة عندي الدائرة اللي مأشر عليها بالازرق اكبر دائرة معناها ان أكثر وحده فيها Ag.
النوع الثاني من precipitation واللي هو ouchterlony gel diffusion
Qualitative technique
هِنا فهالتست انا بضيف أكثر من Ag وبشوف هل فيه بينهم تشابه او لا
Qualitative technique
هِنا فهالتست انا بضيف أكثر من Ag وبشوف هل فيه بينهم تشابه او لا
النتايج بتكون على شكل أشكال: identity, partial identity, non-identity
تعالوا نشرح كل وحده لحالها
تعالوا نشرح كل وحده لحالها
اول وحده واللي هي identity، شوفوا الدائرة الخضراء هي عِبارة عن Ab والدائرتين السوداء هم Ag
وانا الان مدري اذا هم متشابهين او لا انزين؟
الحين الاثنين Ag بيتجهون إلى Ab وهو راح يتجه لهم وراح يكونون خط متواصل بدون تقاطع، الخط يشبه القوس “ Arc “
وانا الان مدري اذا هم متشابهين او لا انزين؟
الحين الاثنين Ag بيتجهون إلى Ab وهو راح يتجه لهم وراح يكونون خط متواصل بدون تقاطع، الخط يشبه القوس “ Arc “
أما في حالة partial Identity، هِنا فيه اثنين Ag بس انهم مب زي بعض واحد موجود فالاثنين وواحد لا، يعني فيه عامل مشترك بينهم
في البداية بيصير تفاعل زي اللي قبل شوي وبيكونون قوس بس بعدها ال Ag الزايد راح يمشي شوي زيادة
في البداية بيصير تفاعل زي اللي قبل شوي وبيكونون قوس بس بعدها ال Ag الزايد راح يمشي شوي زيادة
وآخر حالة عِندنا اللي هي non-identity:
هِنا فيه اثنين Ag بس انهم مختلفين تماماً ف كل واحد منهم بيسوي خط وماشي في حال سبيله لكنهم بيتقاطعون بس
هِنا فيه اثنين Ag بس انهم مختلفين تماماً ف كل واحد منهم بيسوي خط وماشي في حال سبيله لكنهم بيتقاطعون بس
طيب خلصنا من precipitation ونجي نتكلم عن agglutination وعِندنا فيه عدة أنواع خنتكلم عنهم واحد واحد
• Indirect agglutination
فيه منه نوعين Active + passive شالفرق مابينهم؟
⁃Active: هِنا عندي particulate “ insoluble ▶️ bound to cell or tissue “ Ag + Ab واذا صار بينهم تفاعل راح يكون واضح.
فيه منه نوعين Active + passive شالفرق مابينهم؟
⁃Active: هِنا عندي particulate “ insoluble ▶️ bound to cell or tissue “ Ag + Ab واذا صار بينهم تفاعل راح يكون واضح.
⁃Passive: هنا الفرق ان Ag بيكون soluble فَ أحتاج اول اني احوله إلى insoluble احتاج اني اربطه بشيء يشبه cell بحيث ان لو صار فيه تفاعل يكون واضح وعادة نستخدم latex يكون زي الخرز بيتحول بعدها الى insoluble وبعد ما اضيف soluble Ab راح يكون التفاعل واضح
Direct agglutination•
هِنا راح أسوي عدة تخفيفات من عينة المريض واللي فيها الانتي بودي وراح أضيف رقم ثابت من insoluble Ag
هِنا انا انا بسوي تخفيفات عشان أعرف Titer
يعني بظل اتتبع + الى اخر وحده في التخفيفات واخر وحده عطتني + بيكون هذا Ab concentration واسجل في النتيجة هالرقم
هِنا راح أسوي عدة تخفيفات من عينة المريض واللي فيها الانتي بودي وراح أضيف رقم ثابت من insoluble Ag
هِنا انا انا بسوي تخفيفات عشان أعرف Titer
يعني بظل اتتبع + الى اخر وحده في التخفيفات واخر وحده عطتني + بيكون هذا Ab concentration واسجل في النتيجة هالرقم
من التطبيقات على Direct agglutination:
⁃Widal test: إختبار السالمونيلا
⁃Brucella agglutination test.
⁃Coombs test.
⁃Widal test: إختبار السالمونيلا
⁃Brucella agglutination test.
⁃Coombs test.
Reverse passive agglutination:
نفس passive بالضبط بس هِناك كنت أربط Ag بِ latex وهِنا في reverse راح أربط Ab بِ latex
بستخدمه في اختبارات معينه مِثل: CRP, RA factor, hepatitis B.
نفس passive بالضبط بس هِناك كنت أربط Ag بِ latex وهِنا في reverse راح أربط Ab بِ latex
بستخدمه في اختبارات معينه مِثل: CRP, RA factor, hepatitis B.
⁃agglutination inhibition•
هنا المبدأ حق هالتست هو المنافسة
الخطوات : راح أستخدم عينة المريض + Ab ⬅️ بعدها راح أضيف Ag حق نفس Ab اللي انا قاعدة أبحث عنه
لو المريض مصاب وعنده Ag بيكون خلاص كل Ag اللي عنده ارتبط مع Ab ومارح يتفاعل مع الانتي بودي الجديد اللي انا حطيته
هنا المبدأ حق هالتست هو المنافسة
الخطوات : راح أستخدم عينة المريض + Ab ⬅️ بعدها راح أضيف Ag حق نفس Ab اللي انا قاعدة أبحث عنه
لو المريض مصاب وعنده Ag بيكون خلاص كل Ag اللي عنده ارتبط مع Ab ومارح يتفاعل مع الانتي بودي الجديد اللي انا حطيته
لكن لما يكون مو مريض وماعنده Ag بيكون فِري ولما اضيف الانتي بودي بيرتبط فيه وبيصير تفاعل
نجي لآخر واحد من أنواع Agglutination واللي هو coagglutination•
هِنا فهالنوع نفس اللي قبل لِكن الإختلاف بدال مااني استخدم latex كنوع من carrier هِنا بستخدم البكتيريا
وغالباً يستخدمون staphylococcus aureus لأن عندها بروتين A في سطحها الخارجي واللي تمتص FC portion of Ab molecules
هِنا فهالنوع نفس اللي قبل لِكن الإختلاف بدال مااني استخدم latex كنوع من carrier هِنا بستخدم البكتيريا
وغالباً يستخدمون staphylococcus aureus لأن عندها بروتين A في سطحها الخارجي واللي تمتص FC portion of Ab molecules
شنو الفرق مابين precipitation ومابين Agglutination ؟
الفرق إن في precipitation اثنينهم soluble
اما في Agglutination الانتي بودي soluble وال Ag insoluble
الفرق إن في precipitation اثنينهم soluble
اما في Agglutination الانتي بودي soluble وال Ag insoluble
جاري تحميل الاقتراحات...