Zubaydah | زُبَيْــدَة
Zubaydah | زُبَيْــدَة

@_izubaydah

7 تغريدة 707 قراءة Nov 20, 2020
📍 ملخص بسيط عن البيولوجيا الجزيئية وكل ما يخص الـ Molecular Biology Lab Methods 🧬
سأضع الأساسيات تحت هذه التغريدة.. 🔬🧫
( السلسلة ستكون باللغتين العربية والإنجليزية لعدم وجود مفردات مماثلة )
أولًا: ما هي الحيوية الجزيئية وعلاقته بالكيمياء الحيوية؟
-الكيمياء الحيويةBiochemistry دراسة المواد الأساسية التي تتشكل منها الأحياء
-الأحياء الجزيئيMolecular Biology دراسة الجزيئات الحيوية(مكونات الخلية)
-علم الوراثةGenetics دراسة انتقال الصفات القابلة للتوريث عبر الكائنات الحية
في هذه الصورة مقارنة بين تخصصي الكيمياء الحيوية والبيولوجيا الجزيئية 🧬
ثانيًا: التقنيات المستخدمة في مجال الحيوية الجزيئية | Molecular Biology Methods: 🔬👩🏻‍🔬
1️⃣ تقنية Polymerase chain reaction -PCR
- تقنية تستخدم لعمل نسخ عديدة من DNA sequence
- تستخدم "primers" خاص لفصل أو تقسيم الـ DNA
- تتطلب temperature-mediated enzyme DNA polymerase
- هذا موقع عن التقنية: qiagen.com
- فيديو بسيط عنها: youtube.com
- فيديو يشرحها بالتفصيل في المعمل : youtube.com
2️⃣ تقنية Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)
- تبدأ بعملtranscription للـ RNA into DNA وتعمل amplification of specific DNA targets using PCR
- هذا الموقع يشرحها بالتفصيل: thermofisher.com
- الفرق بين PCR and RT-PCR omegafilters.com
3️⃣Agarose gel electrophoresis
addgene.org
- تقنية تفصل الـDNA حسب الحجم
- شحنة الـDNA سالبة
- يتم تعريض الجل لمجال كهربائي
- المركبات الأصغر حجماً هي الأسرع في الانتقال للقطب السالب
- فيديو مختصر: youtube.com
- فيديو تفصيلي: youtube.com
4️⃣ Purifying DNA from an Agarose Gel
تنقية الجل هي تقنية تسمح بعزل وتنقية جزيئات الـ DNA حسب حجمها.
🖥 | addgene.org
🎥 | youtu.be
5️⃣ DNA ligation
تقنية تجمع عدة جزيئات منفصلة للـ DNA ويتم تجميعها لصنع recombinant DNA 🧬
🖥🎥 | هذا الموقع يشرحها لكم بالتفصيل مع وجود فيديو jove.com
- بروتوكول كامل للتجربة | thermofisher.com
6️⃣ Bacterial Transformation
هي تقنية إدخال الـ DNA إلى خلايا البكتيريا عن طريق جزء الـ Plasmid
🖥 | رابط يشرح التقنية بالتفصيل : sigmaaldrich.com
🎥 | youtube.com
7️⃣DNA cloning
هي تقنية استنساخ الـDNA وعمل نسخ متطابقة منه.
التقنية تبدأ بإدخال الجين أو جزء من الـ DNA الآخر إلى جزء دائري في الجين يسمى plasmid. عملية الإدخال تكون باستخدام انزيمات تعمل“cut and paste” للـDNA وتنتج لنا مركب جديد من recombinant DNA. 🧬
أنواع الـ DNA cloning متعددة ولكن من أهمها:
- Traditional cloning
- thermofisher.com
🎥 | youtube.com
- PCR Cloning
🖥 | neb.com
🎥 | youtube.com
8️⃣ Animal Cell Culture
هي عملية تسمح بنمو الخلايا في بيئة مصنّعة. 🧫
🖥 | موقع يشرحها ويوضح أنواعها : microbeonline.com
🎥 | youtube.com
عملية استخلاص الـ Plasmid DNA من الـ Culture
🎥 | youtube.com
هذه أفضل فيديوات تشرح كيفية عد الخلايا بواسطة Hemocytometer
🎥 | youtube.com
🎥 | youtube.com
🎥 |youtube.com
- Plasmid Purification: to purifying plasmid DNA from bacterial cultures.
- jove.com
9️⃣ Restriction Enzyme Digest
هي عملية سريعة تستخدم في عمليات الاستنساخ للتأكد من هوية Plasmid في الـ DNA.
🎥 | youtube.com
🔟Transfection:
هي عملية نقل الـDNA and RNA إلى eukaryotic cells
ويتم تطبيقها في حالتين: Gene expression and Gene inhibition
هذا موقع وفيديوات تشرح لكم التقنية بالتفصيل.
🖥 | qiagen.com
🎥 | youtube.com
🎥 | youtube.com
1️⃣1️⃣Blots:
تقنيات بسيطة تستخدم لتحديد كتلة ونوع البروتينات.
🔹Southern blots:
خاصة للـDNAs في الـagarose gel
🔹Northern blots:
خاصة للـRNAs في الـagarose gel
🔹Western blots:
خاصة للـProteins باستخدام antibodies في SDS-PAGE gel إلا في حالة كان Native Protein فيستخدم Native-PAGE
توجد تقنيات أخرى تابعة للتقنيات الأساسية، ولكن أحببت أن أكتب عن أهم التقنيات المستخدمة في علم الأحياء الجزيئي. 🧬
أتمنى لكم الاستفادة وبالتوفيق للجميع 💜🤲🏻

جاري تحميل الاقتراحات...